产品货号:
YTB3596
中文名称:
TCEP
英文名称:
TCEP-HCl
产品规格:
1g|5g|25g|100g
发货周期:
1~3天
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TCEP是一种高效、无异味、不含硫醇基的水溶性还原剂,可选择性还原多肽或蛋白质中的二硫键。TCEP具有更佳的稳定性、更广的兼容性、更强的还原性、更好的选择性,而且由于不含巯基,因此在多数应用中不必去除,从而广泛应用于生物化学和分子生物学中,特别是在蛋白质化学、蛋白质组学中,是公认的DTT的良好替代物。
TCEP对还原二硫键选择性极强,除半胱氨酸外,几乎不会与其它氨基酸有反应,并且能在更宽的pH值范围包括酸性条件下使用,从而有效减少酰胺键的水解。TCEP的反应活性温和、易溶、毒性小,且更容易操作,在酸性、碱性溶液中的稳定性都很好。在SDS-PAGE电泳中,一般终浓度在25mM左右的TCEP即可足够还原蛋白样品。
TCEP使用范围广泛,无论是普通的SDS-PAGE中蛋白的还原,还是一些特殊的实验如固相金属离子亲和层析(IMAC)、质谱、Ni柱纯化等其它需要还原二硫键的实验,也特别适用于组氨酸标记蛋白纯化、马来酰亚胺偶联半胱氨酸残基反应,它能够预防半胱氨酸残基形成二硫键,但不像DTT或β-巯基乙醇本身易与马来酰亚胺反应。
- 无气味:与DTT和β-巯基乙醇不同,TCEP是无异味的,有助于创造更加健康的实验室环境;
- 高效:5到50mM的TCEP在数分钟内即可完全还原大多数多肽或蛋白的二硫键(与DTT等效);
- 特异性:选择性的完全还原甚至最稳定水溶液中的烷基化二硫键;
- 快速:在室温和pH5的条件下,不到五分钟即可还原蛋白的二硫键;
- 稳定:耐空气氧化,无挥发性,与蛋白的其它功能基团不反应;
- 通用性:可在广泛pH范围、盐、去垢剂、温度条件下还原多肽和蛋白;
- 兼容性:不含巯基,因此在多数应用中不必去除还原试剂。
英文名称 | Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride |
中文名称 | 三(2-羧乙基)膦盐酸盐 |
CAS号 | 51805-45-9 |
分子式 | C9H15O6P·HCl |
分子量 | 286.65 |
纯度 | ≥98% |
外观 | 白色粉末 |
溶解性 | 易溶于水,最高可达310mg/mL(1.08M),在有机溶剂如乙醇、甲醇等中溶解度较小 |
结构式 |
主要特点 | TCEP | DTT |
气味 | 无 | 轻微的硫磺气味(臭味) |
水溶解性 | 310g/L | 50g/L |
还原性 | 维持2~3周 | 维持3~7天 |
稳定性 | 无挥发性,耐空气氧化,基本不受金属离子影响,与蛋白的其它功能基团不反应 | 挥发性弱,尽量减少暴露在空气中的时间,在Ni2+存在下,快速氧化 |
pH工作范围 | 1.5-8.5 | 6.5-9.0 |
工作浓度 | 5~50mM (大多数体系) | 1~100mM |
Ni2+柱纯化His标签的蛋白 | 适用 | 不适用 |
马来酰亚胺标记蛋白反应 | 标记前不需要去除 | 标记前需要去除 |
组分 | 1g | 5g | 25g | 100g |
TCEP | 1g | 5g | 25g | 100g |
说明书 | 1份 |
保存:室温,有效期1年。
- 本制品用于蛋白变性时,建议95℃水浴或PCR仪加热5分钟,温度过高(如100℃)或时间过长(如超过15分钟),有可能会导致蛋白降解或上样缓冲液中指示剂的颜色异常。
- 本制品在磷酸盐缓冲液中,尤其在中性或碱性磷酸盐缓冲液中很不稳定。因此若实验过程需将本制品配制在PBS缓冲液中使用,必须现配现用。
- 大多数蛋白无需变性剂即可高效还原,但加入盐酸胍等变性剂有助于将内部二硫键暴露而易于和TCEP发生反应。
- 不建议使用尿素作为变性剂,避免形成氰酸酯并与巯基反应。
- 尽量防止金属接触TCEP溶液,否则会一定程度降低TCEP活性。在还原过程中向样品缓冲液中加入5至20mM EDTA有助于防止巯基被二价金属离子氧化,如Zn2+、Cu2+和Mg2+等。
- 还原后样品应尽快使用,长时间放置后会重新生成二硫化物。
- 本制品在溶液中带电荷,因此不适用于等电聚焦(IEF)实验。
- TCEP对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
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